In München geboren, studierte Matthias Eberle Schauspiel an der Folkwang Hochschule Essen. Vor seinem Abschluss wurde er ans Schauspiel Essen engagiert. Von 2010 bis 2018 war er Ensemblemitglied am Schauspielhaus Bochum und wirkte in zahlreichen Uraufführungen, sowie Stückentwicklungen mit. Seit 2018 arbeitet er frei, ist außerdem als Sprecher tätig und steht vor der Kamera. Matthias Eberle wurde mit dem Aalto Preis für junge Künstler und Künstlerinnen ausgezeichnet. In der Spielzeit 2023/24 wird Matthias Eberle das Ensemble am Stadttheater Ingolstadt ergänzen.